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全自动组织研磨机破碎酵母细胞实验-上海净信

实验地点:中科院生物物理所生物大分子国家重点实验室
用户:常文瑞组


 
实验方法
1、破碎前的准备:
   0.1g菌体(本实验以0.1g菌体为例);
   直径3号陶瓷珠;
   研磨机(选用品牌上海净信科技TS-24);
   预处理好的2ML研磨管;
   模块冷冻。
 
2、研磨: 
   0.1g菌体,5000r/min离心1 min后去上清,加入等体积的玻璃珠,加入0.5ML PBS溶液,放入预先冷冻好的模块中,放入上海净信科技的研磨机中,调整频率为60Hz,震荡时间60s.
  注:破菌效率随着液体体积的增加而增加,液体体积达到100ul时开始达到最大破菌效率。
  附:陶瓷珠回收,以下是方法:
      1、将含陶瓷珠的EP管,放置在大烧杯中,用自来水中浸泡2-3天。
      2、用镊子将陶瓷珠和细胞碎片等全部抖落到烧杯中。静置待玻璃珠沉淀后,轻轻将上面悬浮的细胞碎片倒掉,在加水重悬陶瓷珠。
      3、重复步骤2,4-5次直到所有的细胞碎片都去除干净。
      4、加入适量的浓硝酸(将陶瓷珠全部覆盖即可),浸泡过夜。
      5、去离子水洗三次,置烘箱中干燥即可。

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