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多样品组织研磨机使用方法步骤及注意事项有哪些?

文章来源:上海净信 作者:多样品组织研磨机 人气: 发表时间:2021-05-13 13:36

  在实验室中多样品组织研磨机的使用率很高,其中对于动物的研究课题实验也不例外,这种类型的研究在进行实验前往往需要先将动物组织进行样品前处理操作,这时就会使用样品研磨机,得到的处理结果也会更准确快速。

  但是在进行样品处理时需要做好如下操作:

  1、在实验操作前,先将PBS缓冲液进行4℃预冷,然后准备若干冰块备用;使用75%浓度的乙醇溶液对镊子、剪刀进行消毒处理,如果还需对动物组织进行RNA提取,还要使用酒精灯对镊子和剪刀进行再次消毒,以尽可能消除RNA酶。  

  2、所有实验耗材都应进行高温高压灭菌,以保证各种酶不会对后续实验产生影响;将2ml离心管置于冰块上,并加入适量的PBS缓冲液,一般情况下,实验所需的组织匀浆的质量体积比为10%(即0.1g组织样本加入1ml液体)。  

  3、将需要进行研磨的组织样本从零下80℃的冰箱内取出,置于冰上,使用灭菌后的镊子和剪刀,将样本切成小块(每块重量不宜超过0.02g,总重量不宜超过0.2g),然后放入加好相应液体的离心管中,备用;取出已经灭菌的氧化锆研磨球,按照每个离心管一颗的数量,将锆球放入离心管中。此过程需使用镊子进行该操作,并且尽量避免液体飞溅而导致样本污染。

  

  使用多样品组织研磨机处理动物组织的方法步骤如下:  

  放入样品和铅球的离心管标记好编号,然后放入专用的研磨适配器中,盖好盖子,将适配器固定在研磨机上,设置振动频率为1000次/分钟,振动时间为5分钟。  

  但由于振动过程中的撞击和摩擦,会产生大量热量,使得离心管温度升高,所以可以选择具有低温控制功能的设备,或者将适配器放入液氮罐进行预冷冻,并减少研磨时间,避免高温对样本的破坏。

  

  使用多样品组织研磨机切勿盲目操作设备,以免研磨结果不理想,效果不准确:我们在进行实验的时候由于样品的特殊性,因此 要在低温状态下进行,以达到降低样本中的蛋白质、DNA的降解速度。所有实验操作均需要佩戴医用口罩、手套,实验服,在进行离心操作前,提前开机进行预冷,保持4℃左右的低温环境,研磨过程中注意研磨球不要放多,以免导致管壁破裂,造成样品的丢失及污染。

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