高通量组织研磨仪研磨胰腺肿瘤提取RNA的实验步骤

实验目的

研磨破碎肿瘤组织细胞（如胰腺、肺、肝等器官的肿瘤组织），后续提取其RNA。

实验原理

通过研磨珠撞击肿瘤组织细胞，使其细胞膜破裂，其内的RNA暴露。

实验材料和器具

样品：肿瘤组织细胞

仪器：高通量组织研磨仪（上海净信，Tissuelyser-48）

耗材：离心管（上海净信，0.4研磨单位），研磨珠（上海净信，3号）

实验步骤

• 1.取组织块解冻，用生理盐水洗去血污，剪取约0.5g组织，剪小放入0.4研磨单位离心管中；
• 2.加入一粒6号的研磨珠，（如果用0.3研磨单位的离心管，加入三或五粒的3号的研磨珠），加入0.09体积 TES混匀，再加入0.01ml SDS（10%），0.001ml蛋白酶K（20mg/ml），充分混匀；
• 3.离心管放入研磨机中，设置参数13单位振频，60秒，程序结束即可得到破碎原液；
• 4.完成后续RNA提取步骤。

实验结果