高通量组织研磨仪研磨胰腺肿瘤提取RNA的实验步骤
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作者:admin
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发表时间:2019-01-02 06:01:18
实验目的
研磨破碎肿瘤组织细胞(如胰腺、肺、肝等器官的肿瘤组织),后续提取其RNA。
实验原理
通过研磨珠撞击肿瘤组织细胞,使其细胞膜破裂,其内的RNA暴露。
实验材料和器具
样品:肿瘤组织细胞
仪器:高通量组织研磨仪(上海净信,Tissuelyser-48)
耗材:离心管(上海净信,0.4研磨单位),研磨珠(上海净信,3号)
实验步骤
- 1.取组织块解冻,用生理盐水洗去血污,剪取约0.5g组织,剪小放入0.4研磨单位离心管中;
- 2.加入一粒6号的研磨珠,(如果用0.3研磨单位的离心管,加入三或五粒的3号的研磨珠),加入0.09体积 TES混匀,再加入0.01ml SDS(10%),0.001ml蛋白酶K(20mg/ml),充分混匀;
- 3.离心管放入研磨机中,设置参数13单位振频,60秒,程序结束即可得到破碎原液;
- 4.完成后续RNA提取步骤。
实验结果
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