高通量组织研磨仪对植物叶片的液氮冷冻研磨实验
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作者:admin
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发表时间:2018-12-13 01:55:48
【文章导读】“植物叶片的冷冻研磨实验”, 如何应用高通量组织研磨仪研磨植物叶片,以下小编为大家整理研磨植物叶片的详细步骤:
处理材料:植物叶片 (水稻、玉米、小麦、草、蔬菜叶等)
- 1 装物料:将植物叶片截成所需的小段,用镊子夹住,放入1.5/2ml的离心管管底,对离心管进行编号。现以24空离心管适配器为例;
- 2 装研磨珠:每个离心管内装上1个5mm碳化钨(或氧化锆)研磨珠,或3mm碳化钨(或氧化锆)研磨珠5个;
- 3 冷冻保存:将铝合金夹具夹住24孔,固定好,放到专业液氮盒中,加液氮冷冻,3-5分钟,充分冷冻夹具及管内样品。
- 4 溶剂加入:如有需要,在每个离心管中,小心加入裂解液或其他溶剂;
- 4 主机运转:设定转速与时间例如1500转/分钟 3min,点击Start
- 5 研磨过程:在典型研磨时间(2~3min)内,研磨结束。可同时得到2*24=48个通量的样品;
- 6 取下夹具,进行下一步实验。
注意事项:在上夹具时,要注意一是要带上厚一点的手套,防止被液氮冻伤;一是要迅速,且要保证螺栓拧紧,卡上保险扣。然后,启动研磨。高通量组织研磨仪同时适用动物组织(骨骼、肌肉、内脏、毛发等)的研磨,高通量提取DNA/RNA。
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