全自动样品研磨仪提取小鼠尾巴RNA的实验步骤
实验步骤
1、首先将上海净信的组织研磨机上的制冷模块预先置于-20℃,使用时取出安装好。将研磨珠去RNA酶处理。
2、随机抽取小鼠的尾巴100µg,把样本剪成尽可能小段,置于无RNA酶的2研磨单位离心管中(选择耐液氮冷冻管子),同时加入1颗5号研磨珠和2颗3号研磨珠(如果选择1.5研磨单位离心管,只需要加入4-5颗3号研磨珠)。
3、放置于液氮中一起浸泡3分钟,取出放置于预冷模块中,在全自动样品研磨仪上选择13单位频振研磨60s。(该步骤可以根据研磨的细微程度要求可以再重复一遍)
4、把研磨好的样本加入0.06ml的PBS0.14ml的RNAiso Plus(此处选择PBS,可以根据实验需要加入其他提取液,如1ml TRIzol等),继续置于研磨机上选择13单位频振研磨60s。样本将处于糊状。(其他提取试剂有可能会出现泡沫,不影响实验)
5、取出研磨管,放入冷冻离心机中,于4度,12000g离心10分钟
6、小心吸取上清液0.1ml至新的1.5研磨单位离心管中,盖上管盖,在室温上孵育15分种,使样品充分裂解至匀浆液较透明,如果仍有少量颗粒属于正常情况,不影响RNA提取质量和得率。
7、在1.5研磨单位离心管中加入0.02ml氯仿,盖紧管盖,振荡混匀并将其在冰上孵育15分种,于4度,12000g离心15分钟。离心后混合物分层:上清层,中间层,下层;RNA存在于上清层中。
8、将上清层小心转移到一干净的离心管中,加入等体积冰浴的异丙醇,颠倒振荡混匀,将混合的样品在-20度条件,孵育20分种,于4度,12000g离心10分钟。RNA沉淀通常形成片状沉淀附着于管壁或管底。
小心弃去上清,用1ML的冰浴75%的乙醇洗涤RNA沉淀一次,颠倒洗涤离心管管壁,并旋涡振荡样品,尽可能让沉悬浮,于4度,12000g离心5分钟,再次去除上清,晾干沉淀。
10、操作的后,在阴凉处适度干燥RNA沉淀(避免过分干燥,那样会降底它的可溶性)。
11、用适量(一般可用0.01—0.02ml)的无RNA酶水或TE溶液来溶解RNA。抽提好的RNA,保存于-70度。
- 多样品组织研磨仪对杨树树枝组织研磨实验|便于后续检测成分和观察根树枝组织情况 2023-11-27
- 冷冻研磨仪对牛肉的研磨实验效果能否达到肉源性检测要求? 2023-11-20
- 超离心研磨仪对蛇样品研磨实验分享|净信研磨仪轻松解决蛇样品研磨难题 2023-11-17
- 组织研磨机和臼式研磨仪在实验室中有什么具体应用? 2023-11-06
- 医科大学里的实验之用冷冻研磨仪处理人体宫颈实验案例|破解宫颈组织的RNA密码 2023-10-24
- 全自动组织研磨仪的工作原理|高精度样品组织处理设备 2023-08-22
- 多样品组织研磨仪自动化的高效科学实验研究使用方法及优缺点 2023-08-14
- 多样品组织研磨仪与高通量组织研磨仪两者的应用、优缺点及选择 2023-08-07
- 全自动组织研磨仪的优势:高效、均一、安全 2023-07-31
- 高通量组织研磨仪与多样品组织研磨仪的区别和优势及适用范围 2023-07-25
文章推荐
- 多样品组织研磨仪对杨树树枝组织研磨实验|便于后续检测成分和观察根树枝组织情况
- 冷冻研磨仪对牛肉的研磨实验效果能否达到肉源性检测要求?
- 超离心研磨仪对蛇样品研磨实验分享|净信研磨仪轻松解决蛇样品研磨难题
- 医科大学里的实验之用冷冻研磨仪处理人体宫颈实验案例|破解宫颈组织的RNA密码
最新资讯文章
- 组织研磨机和臼式研磨仪在实验室中有什么具体应用?
- 全自动组织研磨仪的工作原理|高精度样品组织处理设备
- 多样品组织研磨仪自动化的高效科学实验研究使用方法及优缺点
- 多样品组织研磨仪与高通量组织研磨仪两者的应用、优缺点及选择
- 全自动组织研磨仪的优势:高效、均一、安全
- 高通量组织研磨仪与多样品组织研磨仪的区别和优势及适用范围
- 土壤研磨机和玛瑙研磨机:有什么区别和特点?
- 探索科技之美|上海净信带您领略实验室仪器新风尚
- 多样品组织研磨仪与冷冻研磨仪在实验室的应用优势
- 实验室组织研磨机精准控制匀浆|提高实验结果可靠性
- 多样品组织研磨机如何维护保养来延长使用寿命与实验准确性
- 高通量组织研磨仪可以磨干样吗?提高实验室研究效率
- 土壤研磨仪能研磨植物吗,研磨实验效果如何?
- 冷冻研磨仪减少样品污染提高实验准确性的秘密武器
- 多样品组织研磨机在实验室工作时的研磨条件
- 实验室常用仪器之全自动组织研磨仪的优点:高效精准易于维护
- 组织研磨仪选购和日常维护全攻略,让您的研磨结果更精准
- 实验室常用研磨仪器之全自动组织研磨仪使用方法
- 组织研磨仪对猕猴桃果肉研磨的效果分析:样品制备与离心分离
- 多样品组织研磨机器再实验中对样品研磨步骤可以仔细到什么程度?